农用抗生素井冈霉素有效使用期研究
摘要:为了了解井冈霉素的有效使用期,进行了室内毒力测定和田间小区试验,结果表明,5%井冈霉素水剂贮存5年(过2年有效使用期)后,对丝核菌仍然具有良好的毒力,田间试验采用7.5 L·hm—2浓度喷雾,对水稻纹枯病具有5%以上防效,与保质期内10%井冈霉素水剂防效相当。
关键词:井冈霉素;有效使用期;水稻纹枯病;防效
中图分类号:S482.2+8 文献标识码:A DOI编码:10.3969/j.issn.1006—6500.2012.05.043
Study on the Effective Period of Jinggangmycin SL
YANG Hong—fu1,WU Cheng—dong2, JI Mu—xiang1, SHU Zhao—lin1, WANG Li—li1
(1.Zhenjiang Institute of Agricultural Sciences, Jurong ,Jiangsu 212400,China ;2.Nanjing Pukou Agricultural Technique Extension Center,Nanjing 211800,China)
Abstract: Virulence of 10% Jinggangmycin SL against Rhizoctonia solani was determined in laboratory.10% Jinggangmycin SL even if had been stored for 5 years was showed to be highly virulent to Rhizoctonia solani. The trail test showed that the control effect of 10% Jinggangmycin SL to rice sheath blight was more than 90% at 10 days after treatment in spite of beyond the effective period.
Key words: jinggangmycin ;effective period;rice sheath blight;control effect
井冈霉素(jinggang mycin)是我国产量最大的农用微生物源抗生素,具有生产成本低、安全、低毒等特点,主要用于水稻、小麦等纹枯病的防治,有效使用期2年。井冈霉素作为一种通过微生物发酵生产的农用抗菌素,为了解其2年后的防治效果,我们就过期5%井冈霉素水剂进行了相关的田间防效试验及室内药效生物测定。
1 材料和方法
1.1 材 料
供试药剂1:已过有效期3年的5%井冈霉素水剂;供试药剂2:未过有效期 5%井冈霉素水剂。供试水稻品种:武运粳7号。
1.2 方 法
1.2.1 菌饼制备 室内生物测定将保存于斜面的丝核菌(Rhizoctonia solani Kuhn)接种于PDA平板上,置于常温下培养。待菌落长至直径约80 mm时,用直径为5 mm的打孔器切取菌落外缘制备成菌饼备用。
1.2.2 带药培养基的制作 在超净台上,按所需浓度稀释供试杀菌剂后,将1 mL待测药液和9 mL已溶好的培养基(45~50 ℃)分别注入直径为90 mm的培养皿中,迅速盖好,在超净台上水平摇动使其铺成均匀含毒平板,每药剂设5个浓度处理,每个处理设3次重复,以加灭菌水的PDA培养基作对照。
1.2.3 杀菌剂毒力测定 在无菌条件下,将制作好的菌饼放在含药平板的培养皿中,然后置于室内常温下进行培养。以十字交叉法定时测量每个菌饼扩展的菌落直径,直到对照组菌落长满皿为止。
根据杀菌剂浓度与供试菌株直径的关系,在Excel工作表中求得各杀菌剂的浓度对数和抑制几率值,再用Excel图表中添加趋势线的方法,求出毒力回归方程,进而得出各杀菌剂的EC50值,对比2种药剂对立枯丝核菌菌株的药效结果。计算公式为:抑菌率= (对照菌落净生长量—杀菌剂处理菌落净生长量)÷对照菌落净生长量×100%。
1.2.4 田间试验
小区面积40 m2,每药剂设3.25 L·hm—2和7.5 L·hm—2 2个处理浓度,以清水处理为空白对照。采用手动背负式喷雾器粗喷雾,每公顷水量40 kg。施药后15 d调查病株率和防效。调查采取双行直线取样法,每处理取5点,每点5穴。
2 结果与分析
2.1 不同年限5%井冈霉素水剂对丝核菌的抑制效果
井冈霉素对丝核菌没有杀死作用,它使丝核菌菌丝体形成不正常分枝而削弱其致病力,尤其对主枝的影响。所以,井冈霉素对丝核菌菌丝抑制中浓度较高,本次试验室内药剂毒力试验结果表明,药剂1抑制丝核菌菌丝生长的EC50=522.1 μg·mL—1,药剂2抑制丝核菌菌丝生长的EC50=514.6 μg·mL—1。两者离体毒力相当。
2.2 不同年限5%井冈霉素水剂对水稻纹枯病的田间病株防效
有研究指出,井冈霉素田间对水稻纹枯病菌的作用明显大于离体条件下药剂的直接作用。本次田间小区试验结果表明,用5%井冈霉素水剂3.25 L·hm—2,兑水40 kg喷雾,井冈霉素田间施药浓度312.5 μg·mL—1,药剂1和药剂2田间防效均达80%以上,其田间活性远超室内PDA平板上的理论抑制作用。而且,药剂1对水稻纹枯病具有良好的防治效果,其防效并未随储存时间的延长而下降。施药后15 d,药剂1对水稻纹枯病株防效与药剂2防效相当,均达90%以上。
3 讨论
将本试验中喷施过已过药效期的井冈霉素水剂7.5 L·hm—2的纹枯病病株和对照小区的病株采集回实验室分别保湿培养5~8 d后,对照不用药小区病株病叶后期有丝核菌菌丝、菌核形成,而用药小区的纹枯病病叶无菌丝和菌核产生。通过以上室内毒力测定、离体培养试验及田间防效试验,已过药效期的井冈霉素水剂对病原菌的毒力及田间对水稻纹枯病的防效与药效期内井冈霉素水剂无差别。
井冈霉素是一种通过发酵工艺产生的碱性的水溶性抗菌素,有A、B、C、D、E、F六种组分。试验证明,井冈霉素产品浸提液以100 ℃煮沸1 h,甚至经120 ℃高压30 min均不影响活性,但加热至135 ℃时,即分解生成一个葡萄糖和一个低分子的井冈胺。因此,在通常贮存条件下,其中的有效成分含量较为稳定,而且有可能在贮存的过程中继续发生化学反应,补充产生新的有效成分,从而保证对有关病害的防治效果。
本试验研究仅就5%井冈霉素水剂进行了试验,对于其他剂型是否有类似的结果没有试验进行验证。另外,建议有关生产企业对已过有效期的井冈霉素水剂进行井冈霉素效价检验,跟踪检测其中有效成分的变化,进一步明确井冈霉素水剂有效期限,避免产品因过期造成不必要的浪费。
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