宫颈液基细胞两种制片方法比较
【摘要】 目的 研究宫颈液基细胞检测系统(TCT) 两种制片方法有无差异。方法 对2010 年5 月至2011年1 月来我院就诊及查体的8306例标本进行分析，其中3850份用膜状液基薄层细胞学制片技术(简称膜式制片法)，4456份用自然沉降法制片。最后统计两种方法制片阳性率，进行比较，看有无差异。结果 自然沉降法制片制片效果好于膜式制片法，阳性率高于膜式制片法，两者比较有统计学意义（P<0.05）。结论 良好的TCT 制片对宫颈病变的诊断有较高价值。
【关键词】
液基细胞；TCT； 膜状液基薄层细胞学制片；自然沉降法制片
宫颈癌是妇女第二大恶性肿瘤,导致全世界每年有23万妇女死亡。巴氏涂片细胞学检查是较早作为筛查宫颈癌的方法,但存在许多不足之处,例如细胞收集不足和涂片不均匀、较厚等,影响显微镜下观察和诊断,近年液基制片技术的出现提高了宫颈癌及癌前病变的检出率,细胞学标本制片质量控制是准确发现病变的前提,它包括标本收集、涂片制备、固定染色等。
1 材料与方法
1.1 一般资料
全部资料来自淄博市妇幼保健院妇科门诊就诊的妇女8306例行TCT检查, 其中有正常体检、白带异常、性交后出血、绝经后出血、不规则阴道流血、宫颈糜烂及外阴赘生物等症状。2010年5月至2010年8月3850例为膜式制片法，2010年9月至2011年1月4456例为自然沉降法制片。TCT取材人员均为经过正规培训的专业人员,两组患者在年龄、孕次、经济、社会地位等方面均有可比性。
1.2 方法
1.2.1 取材方法 取材由接诊医师随时取材,采取专用宫颈细胞取样刷,宫颈刷的尖端进入宫颈管内,在宫颈管内和外口沿同一方向旋转几圈后取出,放入保存液瓶转动细胞刷,将附于细胞刷上的细胞放入保存液瓶内:①取材手法：擦去宫颈上的粘液,将宫颈刷插入子宫颈内,直到只有刷子最下面刷毛暴露在子宫颈外为止,沿顺时针方向旋4~6圈后取出,放入保存液瓶转动细胞刷,将细胞刷的刷头放入保存液瓶内。②标本固定：将标本固定液瓶盖旋紧, 在送检途中不致倒漏,轻轻摇晃固定液瓶,使采集到的细胞,与固定液充分接触,确保被检细胞及时固定,不发生坏死及变形。③特殊情况：如有特殊情况,在申请单和固定液瓶上标识,以供阅片时参考。
1.2.2 制片方法 ①膜式制片法：采用广州三瑞公司生产的膜状液基薄层细胞学制片技术，本公司提供仪器，由经过培训的专人制片，然后巴氏染色。②自然沉降制片法：采用福建泰普公司提供专用耗材，玻片，细胞萃取液，巴氏染液，由经公司培训的专门技术人员制片，染色。
1.3 细胞学诊断
采用国际癌症协会推荐的TBS 分类法,鳞状上皮细胞呈良性反应性病变者为阴性。有宫颈鳞状上皮细胞异常者为阳性,其中鳞状上皮细胞异常包括不典型鳞状上皮细胞(ASC-US),即意义不明的鳞状上皮细胞;无明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞(ASC-H)；低度鳞状上皮内病变(LSIL)； 高度鳞状上皮内病变(HSIL), 和鳞状细胞癌(SCC)。腺上皮不正常称为意义不明的不典型腺细胞AGUS和腺癌。
1.4 统计学方法 所有数据经SPSS 13.0软件包分析，计数资料采用χ2检验。差异性界为P<0.05。
2 结果
2.1 制片效果 一张质量好的片子应达到下列标准：制出的片子清爽,层次分明,无气泡,封胶适量,镜下细胞核、质清楚,角化细胞、非角化细胞一目了然,有助于诊断,此为优等片。制片满意标准：全片有5000个以上的保存完好和形态清晰的鳞状上皮细胞，且有移行区成分(颈管细胞，化生细胞或增生的储备细胞)。
表1结果表明膜式制片法制片满意率远远低于自然沉降法制片，两者比较有统计学意义(P<0.05);表2结果表明
自然沉降法制片阅片ASC-US和LSIL阳性率高于膜式制片法，两者比较有统计学意义(P<0.05),HSIL阳性率两者比较无统计学意义(P>0.05)；SCC、AGC、ASC-H由于阳性例数较少未作统计。
3 讨论
制片方法的选择与质量密切相关，一个标本取材的质量决定诊断的准确性。细胞学涂片质量与诊断质量密切相关，这包括两个方面的质量要求：一是取材的要求，二是制片及染色的要求。为取得足够诊断的细胞数量及定点取样的合格率，就必须要求取样的规范化。标本的细胞数量是诊断质量的决定性因素在TBS(2001年版)中明确规定了评估标本质量的分级，将其分为满意与不满意两部分。后者是指不能对上皮细胞异常做出满意的评估，而前者则是对所取的细胞是否达到在细胞数量及固定部位的细胞类型的出现等方面的评价。讨论的结果要求在细胞数量必须在一定范围内以上：液基制片约为5000个细胞以上保存完好和形态清晰的鳞状细胞。通常在涂片中央区的涂片范围内用40X视野观察最少应拥有10个视野，估算出每个视野平均细胞数量，而且在遇到空白区时，应估计出这些缺少细胞区的百分数。 液基制片又被称作液基薄层细胞制片技术，在二十世纪末被引进。根据制片原理不同，一般分为自然沉降法、膜式法、垂直离心法和水平离心法等四种。共同点是均可以将液基里的细胞标本转移到载玻片上，然后加以染色，制成涂片标本。无论哪一种方法制片，在进行制片时都强调取材和都改进了取材方法。不管是手工还是机器，只要最大限度保持细胞量多和显示细胞结构，阳性率就会提高。就我院情况来看，由于国产膜式制片法受耗材、玻片、仪器对保养液中细胞多少的感应不同，使得制片效果欠佳，细胞重叠、炎细胞覆盖现象多见，或者是制片中央细胞稀疏，周围则密集成片，给阅片者阅片带来困难。自2010年9月以来我院改用自然沉降法制片，制片效果得到明显改善，细胞平铺均匀，染色蓝绿分明，阅片阳性率也得到了提高。
参 考 文 献
［1］ 马博文,郭云泉,马丽丽.液基细胞学技术对宫颈上皮细胞异常筛查作用的研究.中华病理学杂志,2004,33(3)：287.
［2］ 潘秦镜,李凌,乔友林,等.液基细胞学筛查宫颈癌的研究.中华肿瘤杂志, 2001, 23：309-311.
［3］ 周桂华,陈翠兰.液基薄层细胞学方法在宫颈癌筛查中的应用.中国医学杂志,2004,6(11)：1566.