草鱼鱼种养殖中的免疫研究进展

摘要通过对草鱼养殖研究典型试验和报道进行分析，用当代免疫理论和试验成果证明草鱼鱼种养殖中应引起重视的免疫措施和方法，分析了免疫途径、投饵、密度、拉网锻炼等措施对免疫力的影响，介绍了提高草鱼鱼种免疫力的新途径。

关键词草鱼；鱼种养殖；免疫研究；养殖密度；饲料投喂量；措施

中图分类号S943文献标识码A文章编号 1007-5739（2014）11-0280-02

ResearchProgressofImmuneinGrassCarpFishBreeding

LI Gang

（Animal Husbandry and Veterinary Administration of Lixian County in Hunan Province，Lixian Hunan 415500）

AbstractThrough analyzing the grass carp aquaculture research typical test and report，with contemporary immune theory and experimental results it′s proved that the measures and methods in the grass carp fish breeding should be pay attention，effects of the immunization route，bait casting，density，net exercise and other measures on immunity were analyzed，and new ways to increase the grass carp fish immunity were introduced.

Key wordsgrass carp；fish breeding；immune research；breeding density；feed feeding amount；measures

免疫是草鱼鱼种养殖中控制疾病的基础。为此科研人员进行了大量的研究，得到了许多研究成果。用现有的免疫研究成果对这些试验方法、过程和结果进行再分析，可以节省人力物力，并得到一些新的认识，可以为探索更好、更有效的鱼病防治办法提供参考。

1草鱼鱼种的免疫研究进展

1.1免疫方法的研究

何福林对草鱼的免疫方法进行了研究，从其得出的草鱼出血病、烂鳃病、肠炎病、赤皮病4组免疫结果来看，注射效果最好，对出血病的保护率为77.%~92.3%，烂鳃病为25.0%~90.0%，肠炎病为16.7%~63.3%，赤皮病为19.3%~57.7%。口服对出血病的保护率为40.8%~63.0%，对其他3种病的保护率均在20.2%以下，对赤皮病几乎没有作用。浸泡免疫效果最差，对出血病保护率为18.9%~33.3%，对肠炎完全没有效果，对烂鳃病和赤皮病的效果也在40%以下。从免疫结果来看，显然，注射疫苗能够有效的激活鱼类的免疫系统，因此效果好。而对于草鱼鱼种养殖来说更关心的是浸泡免疫和口服免疫的效果[1-3]。

由于消化道酸碱度和多种酶类对疫苗有较大的破坏作用，通过口服免疫的鱼体，其头肾、血液和肠中都检测出抗体分泌细胞，但鳃中却没有检测出，并且在血清中出现特异性抗体，而在皮肤黏液中却未出现。这很好地解释了为什么口服免疫效果不好，并且对赤皮病几乎没有作用。

应用颗粒剂抗原进行浸泡免疫时，1 d后经检测发现抗原物质大部分仍存在于皮肤与鳃中，仅有少部分抗原物质运转到了头肾和脾脏。肾和脾是鱼类重要的免疫器官。真骨鱼的肾脏有许多淋巴细胞与白细胞，组织不经抗原刺激即可产生免疫细胞，并且头肾和中肾细胞经抗原刺激会出现增生。因此，硬骨鱼类的肾脏有中枢免疫器官及外周免疫器官的双重功能。脾脏是第二重要的免疫器官，其经过抗原刺激后发生的增殖反应会产生弥散效果。据相关研究，真骨鱼的脾脏中被发现的抗体生成细胞，但这些细胞是否来源于脾脏仍不能确定[4-6]。

免疫效果不好的原因可能是由于抗原不能进入免疫器官，或者由于数量不够而无法充分有效激活机体的免疫系统。浸泡免疫一般通过使抗原与皮肤、黏膜和鳃接触而进入机体，但却容易受到阻碍。排除这种阻碍的第一个办法是使用佐剂，改变抗原物质的性状，使抗原能够有效进入机体，并使其能在机体内停留更长的时间；另外可以通过刺激单核吞噬细胞而加强其对抗原的递呈性；还可以通过刺激淋巴细胞增强鱼体的免疫应答能力。

1.2免疫研究现状

黄海水产研究所于2012年3月30日 和9月10日先后报道了“鱼用浸泡疫苗多组合佐剂及其应用和使用方法”，并获得了国家的2项专利授权。这2项发明都声称可显著提高疫苗的免疫效果，使用方法简便安全，成本低，无需额外设施与工序，且对鱼的存活率与生长速度无影响。这对于草鱼鱼种的浸泡免疫来说是一个很好的讯息[7-9]。

鸡新城疫弱毒苗的滴鼻滴眼、猪伪狂的基因缺失弱毒苗滴鼻，在免疫方面都取得了很好的效果。弱毒疫苗的优点是病原可在免疫动物体内繁殖，用量小，免疫原性好，免疫期长，成本低，使用方便，克服了灭活苗接种量大，需多次免疫，抗体产生慢，维持时间短，细胞免疫差，抗原需量大，浓度高，只能通过注射接种等缺点。基因工程疫苗可以将抗原插入载体，修饰的载体能够表达保护性抗原基因。细菌与病毒载体产生的疫苗兼具安全性和活疫苗效力。以上几种疫苗都适宜广泛使用，且经济效益好。

国内草鱼免疫防疫技术研究始于20世纪60年代。1969年，珠江水产研究所首次研制出草鱼出血病组织浆灭活疫苗（即“土法”疫苗）。“七五”、“八五”期间，中国水产科学研究院组织联合科技攻关研制出我国第1个高效弱毒疫苗——草鱼出血病弱毒疫苗，并开展多联疫苗的研制，构建了与草鱼出血病弱毒疫苗联用的草鱼细菌性烂鳃、赤皮、肠炎四联灭活疫苗的大规模制备技术。2011年3月，历经多年研制的草鱼出血病活疫苗（GCHV-892株）获得我国首个水产疫苗生产批准文号。该疫苗已在多个省份地区进行了区域性试验，免疫保护率高达90%以上。可以预见下一个草鱼免疫疫苗的突破性发展将是基因工程苗。草鱼鱼种的免疫将从基因工程苗和佐剂中受益。

2养殖密度和饲料投喂量对草鱼鱼种非特异性免疫力的影响

2.1高密度养殖严重影响草鱼鱼种的非特异性免疫

施海涛在《高密度放养导致草鱼烂鳃病》中进行试验，2007年某鱼种培育场连片鱼种池6 hm2，6月中下旬至7月上旬，水面又放养夏花15万尾/hm2左右，其中草鱼的放养密度达7.5万~9.0万尾/hm2。剔除水草的投喂量外，颗粒料的投饵率均在6%以上，少数塘口的投饵率高达10%。“填鸭式”的饲喂方式，加之池塘水位多在0.5～1.2 m，鱼池的水体自净力非常微弱。鱼池超负荷的利用，导致草鱼夏花小车轮虫并发烂鳃病的流行，发病率近100%。

王文博等利用平均体重（53.05±5.03）g的草鱼试验，结果发现高密度养殖从3个方面显著影响草鱼鱼种的非特异性免疫功能。一是高密度对草鱼的血清杀菌活性造成了极大抑制，可能也引起了补体活性或浓度的下降，或者是补体中某些组份的失活，从而阻断了补体的激活途径使其不能发挥杀菌作用。二是经长时间高密度放养的草鱼吞噬细胞吞噬百分率、吞噬指数2项指标都显著降低，且随时间增长呈下降趋势。三是高密度组草鱼脾脏与正常鱼相比有明显的萎缩症状。脾脏的脏器系数（脏器系数=脾脏重量/体重×100%）平均值为0.005%~0.044%，显著低于对照组的0.12%。合理密养有利于草鱼鱼种的非特异性免疫增强[10]。

2.2投饵不当使草鱼鱼种的非特异性免疫力下降

鱼体的健康状况对其免疫能力有一定影响，当营养物质摄入量不当时会使鱼的抗病能力下降。蛋白质的缺乏和不足导致淋巴细胞数目的降低，对刺激引起的反应降低，NK细胞活性降低；高蛋白则会加大代谢负担和能量消耗。鱼体组织中多不饱和脂肪酸（PUFA）的含量高，组织易因脂类氧化酸败而发生变化，一般情况下鱼饲料中的营养物质可以保证鱼的必需脂肪酸（EFA）的需要，PUFA是细胞膜的重要组成部分，不饱和脂肪酸对于鱼体生长发育至关重要，同时对于提高鱼的免疫能力也是必需脂肪酸。许多鱼类异常反应和疾病均与饲料中PUFA氧化酸败有关，例如鳍损伤和皮肤发炎等症状均与此有关。VC在鱼体生长过程中也很重要，在伤口愈合、机体代谢等方面作用显著，并且VC可有效降低环境的负面影响，提高鱼类抵抗几种细菌和病毒病原体的能力。饲喂的日粮中含有VC（>300 mg/kg）可有效降低鱼类由于水质恶劣而引发的中毒症状，提高鱼对环境应激的适应能力。VE与VC、类胡萝卜素和硒都是保证鱼体免疫系统正常发挥作用的必需物质，可以降低脂类过氧化物对免疫系统及其他组织的破坏作用，所以为保证鱼类的免疫能力，在高浓度PUFA和氧化剂促进剂（铁、铜等）日粮中必须提高VE的添加量。V■参与体内碳水化合物的代谢，草鱼饲料中增加V■有明显促长和节约饲料的效果。VA参与机体免疫器官的生长发育，缺乏将造成免疫器官损伤。微量元素在鱼类免疫器官的发育过程中作用较大，缺乏时会引起一系列免疫能力下降问题。

3增强水生动物免疫力的新措施

3.1益生菌增强免疫力

草鱼肠道内的短乳酸杆菌可以增加肠内乳酸菌数量，降低水和消化道中弧菌数量，调整养殖水体和肠道菌群的构成。投喂富含光合细菌的饲料能有效促进草鱼的生长发育，显著提高生长率，并且能提高草鱼肝脏及血清中碱性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）、超氧化物歧化酶（SOD）活性。

3.2免疫多糖等能显著提高草鱼鱼种的免疫力

黄芪多糖具有提高动物免疫力、阻止病毒复制、杀灭细菌、排出毒素等功效。马贵华等[5]用黄芪多糖等免疫增强剂，对4块不同水域进行了草鱼出血病、烂鳃病和肝胆综合症（每块水域的发病情不完全一致，除出血病外其他2种并发1种或3种同时存在）治疗初步试验。结果2~4 d全部治愈，经过6 d给药巩固治理，完全防止了复发。投喂由黄连、黄柏、黄芪、板蓝根、茵陈、甘草等组成的中草药药饵，并辅以VC、VE等药物护肝，对提高鱼类的抗应激能力和免疫力效果显著。

3.3水质调节和拉网锻炼增强草鱼鱼种免疫力的有效措施

草鱼鱼种喜好生活在水质较清新的环境中。在养殖过程中由于剩余饵料、鱼类粪便等长久积聚，使得水质恶化，容易引发暴发性疾病。水体缺氧和有毒物质妨碍机体的正常机能，使鱼体抵抗力下降。据此采用充气、换水、冲水和益生菌改良水质等方法增强草鱼鱼种免疫力。拉网锻炼可明显增加鱼类粘液分泌，溶菌酶活性显著升高，加速免疫细胞的分化和生长。李必华的草鱼大规格鱼种高产技术——一养到底法也把定期拉网锻炼做为增强草鱼鱼种体质的重要方法，而且还推荐当年鱼种应拉网6~7次。

4结语

草鱼鱼种养殖中通过适当降低密度，控制饵料等一系列措施，可避免大量抗生素的使用，以获得更加健康的鱼种，应引起广大渔民的重视。基因工程活疫苗研究将是鱼种免疫的研究方向，也将是草鱼鱼种养殖中新的养殖技术方法。

5参考文献

[1] 何福林.草鱼多联佐剂苗最佳免疫方法的探讨[J].淡水渔业，2001（6）：41-43.

[2] 闫若潜.动物疫病防控工作指南[M].北京：中国农业出版社，2009.

[3] 李桂梅，解绶启，雷武，等.异育银鲫幼鱼对饲料中缬氨酸需求量的研究[J].水生生物学报，2010（6）：91-99.

[4] 李必华.草鱼大规格鱼种高产技术——一养到底法[J].养殖与饲料，2003（7）：30-31.

[5] 马贵华，石和芹.黄芪多糖等中草药防治草鱼出血病的初步试验[C].黄山：纪念《元亨疗马集》付梓400周年中国畜牧兽医学会中兽医学分会2008年学术年会华东区第十八次中兽医科研协作与学术研讨会暨兽药发展论坛论文集，2008.

[6] 丁 丽，周维仁，章世元，等.益生菌在水产上的应用及其对鱼类肠道菌群的影响[J].饲料工业，2009（20）：33-36.

[7] 谢一荣，吴锐全，谢骏，等.维生素C对大口黑鲈生长与非特异性免疫的影响[J].南方水产，2006（3）：44-49.

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[9] 尤宏争，赵子仪，崔培，等.维生素C对水产动物促生长和免疫增强功能的研究进展[J].河北渔业，2010（6）：55-59.

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