KLKs基因表达对卵巢癌恶性度评估初探

对照，以PBS替代抗KLKn单抗以作空白对照。

1.3 观察指标

Klk10，11免疫组化结果和Klk10，11的定量表达情况。

1.4 评价指标

所有患者KLKll，KLK10免疫组化的结果：如果在细胞胞核及胞质中出现棕黄色的反应物即判定为阳性表达。依据切片中的阳性细胞数及细胞阳性百分比将结果区分为：无表达（-）：检测切片当没有阳性细胞；少量表达（+）：检测切片中阳性细胞<25%；一般表达（++）：检测切片中阳性细胞数≥25%、<50%；大量表达（+++）：检测切片中阳性细胞≥50%。

1.5 统计方法

采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行分析和处理，染色反应灰度值采用均数±标准差（x±s）表示，两组间的均数比较行t检验，多个样本间的均数行单因素方差分析，klk10，11表达同卵巢癌的恶性程度评估分析使用χ2检验。

2 结果

2.1 Klk10，11免疫组化结果

研究结果显示：KLK11都表达于健康卵巢、卵巢良性肿瘤、卵巢癌上皮组织细胞的胞质与胞核。但根据数据可以看出，卵巢癌组织中klk11的表达明显不如正常卵巢组织，差异有统计学意义（P<0.05）；卵巢良性肿瘤组织中klk11的表达与正常卵巢组织klk11的表达差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

表1 各组卵巢组织中klk11的表达

注：*表示与正常卵巢组织相比差异有统计学意义。

由结果可以看出，Ⅰ/Ⅱ卵巢癌组织中的klk11表达阳性率显著高于Ⅲ/Ⅳ期卵巢癌组织中的klk11表达阳性率，结果差异有统计学意义（P<0.05）；G1级卵巢癌组织中的klk11表达阳性率和G2/G3级卵巢癌组织中的klk11表达阳性率差异无统计学意义（P>0.05）；不同组织学类型的卵巢癌组织中的klk11表达阳性率存在着显著差异，结果差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 卵巢癌组织中KLK11表达与其临床病理参数的关系

2.2 卵巢癌KLK10与KLK11表达定量分析

Klk11于卵巢癌组织中的表达比它在正常的卵巢组织和良性的卵巢肿瘤组织表达的水平要低，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1；Klk10于卵巢癌组织中的表达比它在正常的卵巢组织和良性卵巢肿瘤组织表达的水平要低，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

表3 各组卵巢组织中KLK10的表达

3 讨论

人类组织的激肽释放酶基因（human tissue kallikreins gene，KLKs）是一组高度保守的基因簇，在肿瘤组织中差异性表达。KLKs的生物学功能主要通过其表达产物人类组织激肽释放酶发挥作用[3]。

该研究应用免疫组化方法对KLK11、KLK10于卵巢癌、卵巢的良性肿瘤和卵巢的正常组织当中表达情况进行研究。研究结果表明：①KIKll与KLK10蛋白hKn于卵巢上皮的细胞当中均有表达；②KIKll与KLK10蛋白hKn表达水平同卵巢细胞良恶性相关，它们于卵巢癌组织中的表达比在正常的卵巢组织和良性的卵巢肿瘤组织中表达要低{KLK11（P=0.044）KLK10（P=0.002）}；③KLK11与KLK10hKn表达水平同卵巢癌临床分期相，在最初卵巢癌组织中（Ⅰ/Ⅱ期）KLK11和KLK10hKn的表达水平明显优于晚期的卵巢癌（Ⅲ/Ⅳ期 ）{KLK11（P=0.010）， KLK10（P=0.032）；④KLKll与KLK10hKn的表达水平和卵巢癌组织学类型有关，KLKll与KLK10hKll在浆液性的卵巢癌组织中的表达与其他卵巢癌的组织类型相比有显著升高（KLK11：P=0.003，KLK10：P=0.003）。这与已有的研究结果相类似[4]。

综上所述，KLK10和11有望成为早期诊断卵巢癌的血清标志物，考虑到KLK群的生物学特点，对它的检测对于卵巢癌和其他类型播散性肿瘤的区分十分有益。

[参考文献]

[1] Kang WD，Choi HS，Kim SM.value of serum CA125 levers in patients with high-risk，early stage epithelial ovarian cacer[J].Gynecol Oncol， 2010，116（1）：57-60.

[2] Evans DG，Gaarenstroom KN，Stirling D.Screening for familial ovarian cancer：poor survival of BRCA1/2 related cancer[J].J Med Genet，2009，46（9）：593-597.

[3] 苏晓峰.Kallikrein7基因在胃癌中的表达及其siRNA对胃癌细胞增殖的影响[D].上海：第二军医大学，2012.

[4] 王焕春.KLK5在乳腺癌中的表达及其靶向microRNA的预测和验证[D].泰安：泰山医学院，2012.

[5] 李利文.KLK15基因在甲状腺肿瘤中的表达和意义[D].郑州：郑州大学，2013.

[6] 褚芳波，陈英剑，胡成进，等.人类组织肽释放酶在卵巢癌中的表达及意义[J].国际肿瘤学杂志，2014（8）：608-611.

[7] 李磊.Kallikrein10的调控机制及其肿瘤临床应用的价值[J].中国肿瘤生物治疗杂志，2014，21（1）：109-113.

[8] 吴艳花.人组织激肽释放酶5抗体制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立[D].泰安：泰山医学院，2012.

（收稿日期：2015-02-05）

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