M342抗除草剂基因CAPS标记的开发与应用

材料，开发能快速准确检测抗性基因BnALS3R基因型的CAPS标记，为油菜抗除草剂分子辅助选择育种奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料与试剂

M342、M294-2等纯合抗性材料是由江苏省农业科学院经济作物研究所油菜研究室在EMS诱变体库中通过非选择性除草剂大群体定向筛选或通过与M342杂交回交转育获得，宁油20号，N131、D1-2、D3-1等敏感材料，MICMS双低恢复系N221、N340和N341由本研究室保存。

高保真性DNA聚合酶KOD-Plus及PCR試剂购自东洋纺（上海）生物科技有限公司，克隆载体pEASY-1购自北京全式金生物技术有限公司。DNA分子量标准、普通TaqDNA聚合酶、dNTPMixture、10XExTaq Buffer PCR、PCR产物平末端加A试剂盒均购自TaKaRa生物工程有限公司（中国大连）。大肠杆菌E.coli DH5a由本实验室保存。引物合成、DNA测序均由南京金斯瑞生物科技有限公司完成。BsrDI限制性内切酶（NEB）购于南京伟沃生物科技有限公司。苯磺隆除草剂为江苏省激素研究所股份有限公司生产的10%苯磺隆可湿性粉剂。

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